高壓蒸汽滅菌的使用方法與注意事項(xiàng)       

高壓蒸汽滅菌的原理

在密閉的蒸鍋內(nèi)，其中的蒸汽不能外溢，壓力不斷上升，使水的沸點(diǎn)不斷提高，從而鍋內(nèi)溫度也隨之增加。在0.1MPa的壓力下，鍋內(nèi)溫度達(dá)121℃。在此蒸汽溫度下，可以很快殺死各種細(xì)菌及其高度耐熱的芽孢。

高壓蒸汽滅菌的操作方法

（1）在外層鍋內(nèi)加適量的水，將需要滅菌的物品放入內(nèi)層鍋，蓋好鍋蓋并對稱地扭緊螺旋。

（2）加熱使鍋內(nèi)產(chǎn)生蒸氣，當(dāng)壓力表指針達(dá)到 33.78kPa時，打開排氣閥，將冷空氣排出，此時壓力表指針下降，當(dāng)指針下降至零時，即將排氣閥關(guān)好。

（3）繼續(xù)加熱，鍋內(nèi)蒸氣增加，壓力表指針又上升，當(dāng)鍋內(nèi)壓力增加到所需壓力時，將火力減小，按所滅菌物品的特點(diǎn)，使蒸氣壓力維持所需壓力一定時間，然后將滅菌器斷電或斷火，讓其自然冷后再慢慢打開排氣閥以排除余氣，然后才能開蓋取物。

高壓蒸汽滅菌的關(guān)鍵

完全排除鍋內(nèi)空氣，使鍋內(nèi)全部是水蒸氣，滅菌才能徹底。高壓滅菌放氣有幾種不同的做法，但目的都是要排凈空氣，使鍋內(nèi)均勻升溫，保證滅菌徹底。

排凈鍋內(nèi)空氣的常用方法

關(guān)閉放氣閥，通電后，待壓力上升到0.05MPa時，打開放氣閥，放出空氣，待壓力表指針歸零后，再關(guān)閉放氣閥。關(guān)閥再通電后，壓力表上升達(dá)到0.1MPa時,開始計(jì)時，維持壓力0.1～0.15MPa 20分鐘。

降壓到一定程度后可緩慢放氣 / 壓力平衡后開蓋

到達(dá)保壓時間后，即可切斷電源，在壓力降到0.5MPa，可緩慢放出蒸氣，應(yīng)注意不要使壓力降低太快，以致引起激烈的減壓沸騰，使容器中的液體四溢。當(dāng)壓力降到零后，才能開蓋，取出培養(yǎng)基，擺在平臺上，以待冷凝。不可久不放氣，引起培養(yǎng)基成分變化，以至培養(yǎng)基無法擺斜面。一旦放置過久，由于鍋爐內(nèi)有負(fù)壓，蓋子打不開，只要將放氣閥打開，大氣壓入，內(nèi)外壓力平衡，蓋子便易打開了。

關(guān)于高壓蒸汽滅菌的滅菌時間和滅菌壓力

對高壓滅菌后不變質(zhì)的物品，如無菌水、栽培介質(zhì)、接種用具，可以延長滅菌時間或提高壓力。而培養(yǎng)基要嚴(yán)格遵守保壓時間，既要保壓徹底，又要防止培養(yǎng)基中的成分變質(zhì)或效力降低，不能隨意延長時間。

高壓蒸汽滅菌的注意事項(xiàng)：

（1）待滅菌的物品放置不宜過緊。

（2）必須將冷空氣充分排除干凈，否則鍋內(nèi)溫度達(dá)不到規(guī)定溫度，影響滅菌效果。

（3）滅菌完畢后，不可立即放氣減壓，否則瓶內(nèi)液體會劇烈沸騰，沖掉瓶塞而外溢甚至導(dǎo)致容器爆裂。須待滅菌器內(nèi)壓力降至與大氣壓相等后才可開蓋。

（4）裝培養(yǎng)基的試管或瓶子的棉塞上，應(yīng)包油紙或牛皮紙，以防冷凝水入內(nèi)。

（5）為了確保滅菌效果，應(yīng)定期檢查滅菌效果。

       常用的方法是將硫磺粉末（熔點(diǎn)為115℃）或安息香酸（熔點(diǎn)為120℃）置于試管內(nèi)，然后進(jìn)行滅菌試驗(yàn)。如上述物質(zhì)熔化，則說明高壓蒸氣滅菌器內(nèi)的溫度已達(dá)要求，滅菌的效果是可靠的。也可將檢測滅菌器效果的變色膠紙（其上有溫度敏感指示劑）貼于待滅菌的物品外包裝上，如膠紙上指示劑變色，亦說明滅菌效果是可靠的。

（6）現(xiàn)在已有微電腦自動控制的高壓蒸氣滅菌器，只需放去冷氣后，儀器即可自動恒壓定時，時間一到則自動切斷電源并鳴笛，使用起來很方便。

 ( 7 ) 先滅菌再清洗原則：對于任何高壓滅菌后會重復(fù)使用的污染（有潛在感染性）器材不應(yīng)當(dāng)事先清洗，必須在高壓滅菌或消毒后再進(jìn)行清洗、修復(fù)。

高壓蒸汽滅菌的對象/應(yīng)用：

高壓蒸汽滅菌是最常用的滅菌方法，一般以 101.33kPa處理15～20min，可達(dá)到對物品進(jìn)行滅菌的目的。凡耐高溫和潮濕的物品，如常用培養(yǎng)基、生理鹽水、衣服、紗布、玻璃器材等都可用本法滅菌。

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